Capítulo 3

Proteína C Reactiva (PCR)

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OBJETIVOS

- Establecer correlación clínico patológica a partir de los resultados obtenidos

en el desarrollo de la prueba.

- Relacionar la PCR con otras pruebas para establecer el diagnóstico.

- Relacionar la PCR con el estado inmunológico del paciente

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3.1. Generalidades
Durante cualquier proceso inflamatorio aparece en la sangre una proteína anormal

denominada Proteína C reactiva (PCR), la cual no existe en la sangre de un individuo sano

o suele encontrarse en escasa concentración. La Proteína C Reactiva es una pentraxina

corta (al igual que la proteína Amiloide sérica P), sintetizada en el hepatocito a partir del

estímulo de la IL-6, IL-1 y TNF- α, teniendo como ligando la fosforilcolina que se encuentra

en las membranas bacterianas y en las células apoptósicas.

Esta proteína se forma rápidamente en la sangre y los líquidos corporales como respuesta

a los estímulos nocivos. Su síntesis mayor ocurre en el Hígado, pero también en los

adipocitos, siendo mayormente abundante en el líquido peritoneal, pericárdico, pleural y

sinovial. La PCR constituye el reactante de fase aguda más clásico y dramático. Su

concentración puede alcanzar cifras de hasta 1000 veces mayor y disminuye rápidamente

cuando el proceso inflamatorio ha cesado.

La PCR carece de especificidad en la valoración de enfermedades inflamatorias y

determinación de la gravedad en las situaciones acompañadas de necrosis tisular como

infarto del miocardio, cáncer o artritis reumatoide. Durante las primeras 18 a 24 horas de

iniciada la lesión hística se detecta PCR en el suero del paciente. Pudiéndose utilizar para

el seguimiento al tratamiento y progreso del tratamiento, interpretar la velocidad de

sedimentación globular y vigilar la cicatrización de las heridas, en especial cuando se trata

de lesiones internas, quemaduras o trasplante de órganos.

Este componente sérico fue descubierto por interacción del suero de los pacientes que se

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habían recuperado de infecciones neumococcicas con el polisacárido C de esta bacteria.

Se formaban floculados visibles que permitieron el estudio profundo y la purificación de esta

proteína C- Reactiva (PCR) del suero en la década de 1940. Más adelante se puso de

manifiesto que la PCR se encuentra en el suero de los pacientes que sufren otros trastornos

distintos a las infecciones neumococcicas, pero que aumenta notablemente siempre que

exista necrosis hística. Muchas otras sustancias como el DNA, los nucleótidos, diversos

lípidos y otros polisacáridos reaccionan con la PCR (Hokama, 1982). Su peso molecular

está entre los 118.000 y 144.000 con un contenido sustancial de hidratos de carbono. Su

concentración sérica normal suele ser de 100 ng/ml en el nacimiento, de 170 ng/ml durante

la infancia y de 470 ng/ml a 1340 ng/ml en el adulto. A pesar de estas bajas

concentraciones, la PCR tiene importancia como reactante de fase aguda altamente

sensible (Deodhar, 1989).

Generalmente se determina por su capacidad de precipitar la sustancia C o por métodos

inmunológicos que comprenden la precipitación, el RIA o el ELISA (Saxstad, 1970,; Claus,

1976).

La PCR es una proteína que migra en el grupo gamma de la electroforesis y puede formar

una banda de aspecto monoclonal independiente en aquellos pacientes que presentan una

respuesta inflamatoria intensa. Los niveles de PCR se usan habitualmente como prueba

rápida para evaluar a los pacientes que presentan una respuesta inflamatoria intensa. Los

niveles de PCR también se suelen usar para evaluar presuntivamente procesos infecciosos

bacterianos (niveles elevados), procesos víricos (niveles bajos). También es empleada en

reumatología para vigilar el progreso de un proceso auto inmune.

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3.2. Importancia clínica
La PCR es positiva en las siguientes situaciones:

.- Fiebre reumática

.- Artritis Reumatoide

.- Infarto del Miocardio

.- Cáncer (activo, diseminado)

.- Infecciones bacterianas y virales (fase aguda)

.- Pos operatorio (no complicado)

La presencia de la PCR es mucho más significativa que la elevación de la velocidad de

sedimentación globular (VSG), la cual se altera cuando hay anormalidades fisiológicas.

La PCR tiende aumentar más que los anticuerpos y la VSG, además, disminuye antes

que esta última.

PCR como reactante de fase aguda. La PCR se emplea como reactante de la fase aguda,

al igual que otras proteínas como α-1 antitripsina, glucoproteína α1- ácida, haptoglobina,

ceruloplasmina y fibrinógeno, entre otras. La inflamación hace que los leucocitos liberen

enzimas proteolíticas a los tejidos, las cuales deben ser neutralizadas por los inhibidores de

enzimas para limitar la extensión de la destrucción, entonces entran en juego las proteínas

barredoras como la PCR, la cual ayuda a recoger y transportar los restos celulares y los

productos de desdoblamiento de las células fagocíticas (sistema reticuloendotelial), para

procesarlos y preservar sustancias de valor como el hierro.

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Referencias

Dalyla Alonso-Rodríguez, Ela Moreno-Téllez, Yanet Alarcón-Martínez, Eduardo Pedroso-

Filiberto. Proteína C reactiva como marcador de inflamación en hipertensión arterial aguda.

Rev Med Inst Mex Seguro Soc 2011; 49 (3): 345-347

Emilio González-Jiménez, Miguel A. Montero-Alonso y Jacqueline Schmidt-RíoValle.

Proteína-C reactiva como marcador bioquímico de riesgo cardiovascular. Nutr Hosp. 2013;

28 (6):2182-2187

Manuel Francoa,b, Richard Cooperc, Usama Bilala y Valentı´n Fustera,d. Control de los

factores de riesgo coronarios y terapias basadas en la evidencia:esfuerzos coordinados para

la prevención cardiovascular en España. Rev Esp Cardiol. 2011; 64 (11):962–964

Singer, J.M.; Plotz, C.M.; Parker, E. and Elster, S.K. - Am. J. Clin. Path. 28:611

(1987).

Nilson, L.A. - Acta Pathol. Microbiol. Scand. 73:129 (1998).

Scherffarth, F.; Pérez-Miranda, M. and Goetz, H. - Blut. 20: 296 (1990).

Jhon Bernard Henry. Diagnóstico y tratamiento clínico por el laboratorio. 9ª Ed Masson-

Salvat, Barcelona; 1993.

Frances talaska Fischbach. Manual de pruebas diagnósticas. 5ª Ed. McGraw-Hill

Interamericana. Mexico; 1998.

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9.2. Determinación cualitativa y cuantitativa de
Proteína R Reactiva (PCR).

9.2.1 Principio
La proteína C-reactiva (PCR) sérica con 6 mg/L o concentraciones más elevadas,

provoca una aglutinación de las partículas de látex recubiertas con anti-proteína C-

reactiva.

9.2.2. Reactivo
Suspensión de partículas de látex sensibilizadas con anti- proteína C-reactiva,

azida sódica 0,95 g/L.

C -. Control Negativo: Suero conteniendo menos de 6 mg/L.

C +. Control Positivo: Suero humano conteniendo más de 6 mg/L. El

fabricante garantiza que:

“Todos los componentes de origen humano utilizados en la preparación de los

controles positivo y negativo eran negativos para el antígeno HBs y para los

anticuerpos anti-HCV y anti-HIV. Sin embargo, los controles deben tratarse con

precaución como potencialmente infecciosos”.

9.2.3. Materiales necesarios

 Reactivo látex PCR

 Control positivo

 Control negativo

 Láminas de aglutinación( plásticas fondo negro)

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  Cronómetros

 Pipetas serológicas o automatizadas

 Solución salina (o.9 % de NaCl)

 Suero del paciente

 Rotador automático.

9.2.4. Muestra

Suero fresco recolectado por centrifugación de sangre coagulada. Puede ser

refrigerado entre 2°-8°C durante 48 horas o conservado de manera indefinida

congelado a -20°C.

9.2.5. Procedimiento

[Link]. Técnica cualitativa

- Dejar que el reactivo, los controles y la muestra alcancen la temperatura

ambiente (20-30°C).

- Agitar suavemente el vial del reactivo para dispensar y re-suspender las

partículas de látex en la solución tampón. No agite violentamente.

- Dosificar 0.050 ml (50μl) del suero en una de las secciones de la lámina.

- Dosificar 0.050 ml (50μl) del control positivo y 0.050 ml (50μl) del control

negativo en secciones diferentes de la lámina.

- Añadir una gota del reactivo junto a la gota del suero, del control positivo y

del control negativo.

- Mezclar las gotas con un palillo de manera circular hasta cubrir toda la

superficie de la sección de la lámina.

manualmente o en el rotador automático (60-80rpm) durante 3 minutos.

- Observar la o presencia o ausencia de aglutinación transcurrido dicho

tiempo.

.- Interpretación de los resultados:

La presencia de aglutinación indica un contenido de Proteína C Reactiva en el

suero igual o superior a 6.0 mg/L.

La ausencia de aglutinación indica un contenido de Proteína C Reactiva en el

suero inferior a 6.0 mg/L.

[Link]. Técnica semi-cuantitativa

- Preparación de las diluciones del suero sobre la misma lámina que tiene las

secciones (descritas en el recuadro adjunto).

- Dosificar 0.050 ml (50μl) en las secciones 1 y 2 de la lámina.

- Con la misma pipeta aspirar y expulsar varias veces el suero y la solución

salina contenida en la sección 2

- Transferir 0.050 ml (50μl) a la sección 3.

- Realizar la misma operación del paso 3.

- Transferir 0.050 ml (50μl) a la sección 4

- Realizar la misma operación hasta llegar a la sección 6, en la que después

de realizada la mezcla, se desechan los 0.050 ml (50μl).

- Agitar suavemente el vial de los reactivos y agregar una gota de este a

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 todas las secciones.

- Mezclar con palillos diferentes cada sección.

- Rotar manualmente o en rotador automático de la misma manera descrita

para la técnica cualitativa.

- Observar la presencia o ausencia de aglutinación transcurrido el tiempo.

.- Interpretación de los resultados

El título aproximado corresponderá a la última dilución en la cual se observe

aglutinación y su valor será según la tabla adjunta.

.- Limitaciones del procedimiento:

La lectura de los resultados debe efectuarse a los 3 minutos de iniciada la

reacción.

El exceso de tiempo puede inducir a la interpretación errónea de los mismos.

[Link]. Interferencias

La lipemia (5 g/L), la hemoglobina (5 g/L) y la bilirrubina (15 mg/dL) no interfieren.

Los factores reumatoideos pueden interferir (25 UI/mL). Otros medicamentos y

sustancias pueden interferir.

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Tabla adjunta
Sección
Solución salina (μl) 50 50 50 50 50

Suero (μl) 50 50

Mezclar
y transferir (μl) 50 50 50 50 50

Dilución 1:1 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32

Concentración 12 24 48 96 192
mg/L

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 UNIVERSIDAD SIMÓN BOLÍVAR
PROGRAMA DE MEDICINA
CURSO INMUNOLOGÍA

INFORME DE LABORATORIO
DETERMINACIÓN DE PROTEÍNA C REACTIVA (PCR)

FECHA: GRUPO: SUBGRUPO __

NOMBRES Y APELLIDOS:

RESULTADO OBTENIDO:

ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS.

1. Esquematizar la estructura molecular de la Proteína C Reactiva.

2. Caracterice la Proteína C Reactiva de alta sensibilidad (PCRHs) y su importancia en Infarto

3. Cuáles son las funciones biológicas de la Proteína C Reactiva.

4. Cuales medicamentos pueden interferir en la prueba?

5. Qué relación hay entre la Proteína C Reactiva y la VSG?

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