PRUEBAS DIAGNOSTICAS

PARA MICOSIS

DOCENTE: Segami Salazar Gabriel Hugo

ALUMNA: Ravello Laguna Tracy Alejandra
 ¿Cómo entran los hongos al cuerpo humano?

Los hongos están en el ambiente (suelo, agua, aire, plantas) y, por

lo general, no causan enfermedad en personas sanas, ya que la
piel y las mucosas son barreras naturales que los detienen.

Sin embargo, cuando estas barreras se rompen por alguna lesión

o debilidad del sistema inmunológico, algunos hongos pueden
penetrar el cuerpo y causar infecciones micóticas o micosis.

¿Qué hace que un hongo sea peligroso?

Para que un hongo logre causar una infección, necesita:

Sobrevivir a la temperatura del cuerpo humano (37 °C).
Obtener nutrientes del organismo.
Evadir las defensas del sistema inmune.
¿Quiénes están en mayor riesgo de sufrir micosis?

Personas inmunocomprometidas
En ellos, hongos como Aspergillus o Cryptococcus pueden
causar infecciones invasivas graves

Hongos comunes que afectan la piel, uñas y mucosas

Dermatofitos:
Levaduras del micobioma humano: como Candida
 Otros mecanismos de enfermedad micótica

Además de infecciones directas, los hongos pueden causar

enfermedades por:
Toxinas micóticas: como las aflatoxinas en alimentos contaminados.
Alergias micóticas: por exposición a componentes de la pared del
hongo que generan reacciones alérgicas (como la aspergilosis
alérgica).
 Métodos para el diagnóstico micológico

01. MUESTRAS:
Las muestras recolectadas para microscopia y cultivo están determinadas por el
sitio o sitios de infección y la condición del paciente, las muestras se deben tomar
de forma aséptica ( Sitios estériles del cuerpo y Sitios no estériles ).
Para minimizar el crecimineto bacteriano se debe:

Llegar al laboratorio en menos de 2 horas, para que no se

contamine o pierda calidad.
Además, si el médico sospecha una infección por hongos,
debe avisar al laboratorio, ya que:
Se necesitan medios de cultivo especiales para hongos.
Y se pueden usar técnicas específicas para su detección.
 02. EXAMEN MICROSCOPICO:

¿COMO SE REALIZA?
1. Se toma una muestra líquida (como USO DEL KOH: Disuelve el tejido humano,
esputo, orina, LCR o aspirado). pero no daña las paredes celulares de
2. Se coloca una o dos gotas en un los hongos (Se puede mejorar la
portaobjetos con una solución de
visibilidad agregando calcoflúor blanco,
hidróxido de potasio (KOH) al 10–20%.
que tiñe la pared celular del hongo y se
3. Se añade un cubreobjetos y se observa al
ve con microscopio de fluorescencia).
microscopio con aumentos bajos y altos
(hasta 450x).

OTRAS TINCIONESD QUE SE PUEDEN USAR:

Gram o Wright: En sangre o LCR.
Hematoxilina y eosina (H&E): Para biopsias.
Tinciones especiales más sensibles:
GMS (plata de metenamina de Gomori) → tiñe los hongos de negro.
PAS (ácido peryódico de Schiff) → tiñe los hongos de rojo.
→
Tinción de cápsula para Cryptococcus en secciones posteriores
ESTRUCTURAS MICÓTICAS
CLAVE OBSERVADAS EN
EXÁMENES MICROSCÓPICOS
DE MUESTRAS CLÍNICAS
Diseño de interiores
 03. CULTIVO:
Agar dextrosa de Sabouraud (SDA): Medios con antibióticos:
Contiene glucosa y peptona modificada Se añaden gentamicina o cloranfenicol para
(pH 7.0). inhibir bacterias.
Favorece el crecimiento de hongos y Se agrega cicloheximida para evitar el
dificulta el crecimiento de bacterias. crecimiento de hongos contaminantes
Es el medio clásico para observar las saprófitos.
características morfológicas del hongo.

Agar con papa y dextrosa:

Promueve la formación de esporas o
conidios que ayudan en la identificación.

IMA (Inhibitory Mold Agar):

Estimula mejor la recuperación de
hongos en muestras clínicas
 03. CULTIVO:
Hemocultivos para hongos: Método ideal para fungemia:
Se utilizan medios líquidos especiales (caldo) Se utiliza un tubo de lisis y centrifugación:
para detectar levaduras o hongos en sangre. Se añade sangre directamente.
Las levaduras se detectan en 3 días, pero El tubo contiene anticoagulante y detergente
otros hongos pueden tardar semanas. que rompen los glóbulos rojos.
Se cultivan a diferentes temperaturas: Las células fúngicas quedan libres y se
37 °C para levaduras. concentran por centrifugación.
30 °C para mohos. Luego se siembran en agar micológico.
Para hongos dimórficos (como Histoplasma o
Blastomyces), se usan varios medios y
Identificación del hongo:
temperaturas.
Se basa en:
Características fenotípicas (cómo crece, color,
textura).
Características fisiológicas (cómo metaboliza
ciertos compuestos).
04. SEROLOGIA:
La serología es una técnica de laboratorio que detecta anticuerpos o antígenos
específicos en fluidos del cuerpo, como el suero sanguíneo o el líquido
cefalorraquídeo (LCR). Estos anticuerpos o antígenos están relacionados con la
presencia de una infección micótica (causada por hongos).

¿CUANDO ES UTIL? ¿QUE SE DEBE TENER EN CUENTA?

En pacientes inmunocompetentes (con Sensibilidad: Qué tan buena es la prueba
defensas normales): para detectar a los pacientes realmente
Un resultado positivo (anticuerpos enfermos.
presentes) ayuda a confirmar la infección Especificidad: Qué tan buena es la prueba
micótica. para no confundir la enfermedad con
Un resultado negativo puede ayudar a otras.
descartar la enfermedad. Valor predictivo: Qué tan útil es el
En pacientes inmunocomprometidos, puede resultado según el tipo de pacientes
ser menos confiable, ya que su cuerpo no evaluados y la enfermedad buscada.
siempre produce suficientes anticuerpo
 [Link] MOLECULARES

PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa)

Amplifica el ADN fúngico para detectar y identificar con precisión el hongo
causante de la infección.
Es útil incluso cuando hay muy poca cantidad de hongo en la muestra.
Se usa especialmente para detectar Candida, Aspergillus y otros hongos
invasores en sangre u otros fluidos.

Tipificación por secuencias de múltiples locus (MLST)

Estudia el perfil genético de varias regiones del ADN del hongo, lo
cual permite identificar subtipos (como en Candida, Cryptococcus,
Aspergillus, Coccidioides).
Ayuda a detectar variantes con diferente virulencia, resistencia o
distribución geográfica.
[Link] MOLECULARES

Espectrometría de masas MALDI-TOF Detección de glucano β-(1,3)-D

Detecta proteínas únicas del hongo. Es un componente de la pared celular
Las compara con bases de datos para de muchos hongos.
identificar rápida y precisamente el Si se encuentra en niveles≥ 80 pg/ml
microorganismo. en sangre o LCR, puede indicar:
Es muy usada hoy en día, sobre todo con Candidiasis invasiva
especies de Candida. Aspergilosis
Micosis por hongos dimórficos

Hibridación in situ fluorescente (FISH)

Utiliza sondas que se unen a secuencias
específicas de ADN o ARN del hongo y se
iluminan con fluorescencia para localizar
hongos directamente en tejidos o
muestras clínicas.
 06. PRUEBAS DE SUSCEPTIBILIDAD ANTIMICROBIANA

¿Por qué se hace esta prueba?

Porque algunos hongos pueden desarrollar resistencia a los medicamentos antifúngicos.
No todos los tratamientos funcionan igual en todos los pacientes o contra todos los hongos.
Ayuda a elegir el antifúngico correcto y en la dosis adecuada.

¿Cómo se realiza?
1. Se cultiva el hongo aislado del paciente.
2. Se suspende en un líquido con una cantidad estándar de células (unidades formadoras
de colonias, UFC/mL).
3. Se coloca en placas o pocillos (microtitulación) con distintas concentraciones del
fármaco antifúngico.
4. Se incuba 24 a 48 horas.
5. Se observa cuál es la concentración más baja del medicamento que logra detener el
→
crecimiento del hongo esa es la CIM (Concentración Inhibitoria Mínima).
 06. PRUEBAS DE SUSCEPTIBILIDAD ANTIMICROBIANA

Interpretación de los resultados (según el CLSI):

S (Susceptible): el antifúngico funciona bien.
S-DD (Susceptible dosis-dependiente): funcionará si se usa una dosis más alta.
I (Intermedio): respuesta incierta.
R (Resistente): el antifúngico no funciona contra ese hongo.

Métodos comerciales alternativos:

Etest® (bioMérieux): tira con un gradiente
de concentración del antifúngico.
Sensititre YeastOne® (Trek Diagnostics):
placas listas para uso clínico.
BIBLIOGRAFIA
MUCHAS
GRACIAS