Histología I

Dr. Roberto Gomez Batres

HISTOLOGÍA:
PREÁMBULO
¿Que es?
• Rama de la ciencia que estudia los
tejidos
“Anatomía microscópica”
¿Qué requiere?
• Conocimiento del comportamiento
celular
• Obtención de muestra
• Preparación de muestra
• Uso y conocimiento de microscopios

2
Estructura celular
Citoplasma celular
Célula:
Generalidades
• Unidad mas pequeña
• Funciones especializadas

Clasificación por compartimientos

• Núcleo
• Citoplasma
• Organelos membranosos
• Organelos no membranosos
• Inclusiones
• Citoesqueleto

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 Organelos membranosos Organelos no membranosos
Citoplasma • Membrana celular • Ribosomas
• Citoesqueleto
• REL
• Centriolos
• RER
• Proteasomas
• Mitocondria
• Lisosomas Inclusiones
• Endosomas (orgánulos • Hemosiderina
transitorios)
• Lipofuscina
• Peroxisomas • Glucógeno
• Vesículas • Lípidos
• Cristales

5
 Organelos membranosos

[Link] 6
 Membrana
plasmática
Composición: • Fosfatidilcolina
• Lípidos • Fosfatidiletanolamina
• Fosfolípidos • Fosfatidilserina
• Colesterol • Esfingomielina
Mosaico fluido
• Proteínas • Fosfatidilinositol
• Glucocálix
Procesos
• Estructura y protección
• Transporte
• Difusión simple
• Transporte pasivo
• Transporte activo
• Señalización
Mosaico fluido, Seymour Jonathan Singer y Garth Leonard Nicolson
• Metabolismo 7
 Mosaico fluido
Planas o flotilinas y caveolas
Los elementos pueden Glucocalix
navegar libremente

Factores que afectan la

fluidez
• Temperatura
• Saturación
• [Colesterol]
• Longitud de la cadena (ac.
Carboxílico)
• Proteínas de anclaje (proteínas
transmembranales)
• Asociadas a citoesqueleto
• Asociadas a la matriz extracelular

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Remodelado de la
membrana
• Invaginación (dinamina,
COPs y clatrina)
• Evaginación (exosomas,
ESCRT)
• Abultamiento
• Gemación
• Tubulación
• Ondulación

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Proteínas de Membrana
Diferentes tipos
• Integrales
• Periféricas
Interactúan como:
• Transporte
• Bombas
• Conductos
• Receptores y señalización
• Acoplados a proteína G
• Ligados a procesos catalíticos
• Familia de integrinas
• Enzimático (ATPasa)
• Proteínas estructurales
• Proteínas de enlace
• Integrinas

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 Señalización
Procesamiento y transmisión de Activación de modificaciones
los estímulos extracelulares para postraduccionales como:
regulación de procesos • Fosforilación
fisiológicos. • Glucosilación
• Expresión genética • Acetilación
• Transporte exocitosis/endocitosis • Nitrosilación
• Diferenciación • Ubiquitinación y SUMOilación (small
• Crecimiento/Muerte ubiquitin-related modifier).
• Movimiento
Inactiva +
• Reorganización del citoesqueleto
Cinasa Fosfatasa

Activa
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Transporte de membrana
y transporte vesicular
Difusión
Proteínas de membrana (canales)
• Dominio de poro
• Transporte pasivo
• Trasporte activo
Transporte Vesicular
• Endocitosis
• Dependiente de clatrina
• Independiente de clatrina (Caveolina-flotilina)
• Macropinocitosis
• Fagocitosis
• Independiente de clatrina/Dependiente de actina
(Fagosoma)
• Exocitosis
• Transcitosis

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Micropinocitosis

Proceso constitutivo
Estructura dada por diferentes proteínas:
Endocitosis independiente de clatrinas
• Caveolinas (de 14 a 16 monómeros)
• Caveolina 1 y 2 células no musculares
(excepción de neuronas y leucocitos
• Caveolina 3, células musculares
• Flotilina tipo 1 y 2
• Transducción de señales*
• Dinamina (GTPasa)
• Escisión de la vesícula
• Vesículas de 150nm

13
 Macropinocitosis

• Mecanismo inespecífico para la

captación de moléculas y
líquidos
• Dependientes de actina
independiente de clatrina
• Requiere consumo alto de
energía
• Formación de pliegues y
macropinosoma

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 Fagocitosis
• Proceso independiente de
clatrina/Dependiente de actina
• Formación de seudópodos
• Receptores especializados, alta especificidad
• Intervención de las opsoninas
• IgG, C3b, C4b y lectina fijadora de manosa
principalmente

• Formación de Fagosoma
• Degradación por lisosomas
• Formación de cuerpos residuales
• Exocitosis
• Acumulación

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Endocitosis mediada por receptor
• Endocitosis regulada
• Requiere de un ligando para su
acción
• Participación de la adaptina y
clatrina
• Escisión de la vesícula por GTPasa,
Dinamina
• Participación de chaperonas en el
desensamble de clatrinas
• Independiente de actina
Exocitosis

• Transporte dado del interior hacia el exterior celular

• Material de desecho o material especializado
• Participan proteínas de transporte
• Coatómeros (COP I y COP II)
• Clatrinas
• SNARE
Clasificación
• Constitutiva
• Moléculas producidas y secretadas continuamente
• Regulada (células especializadas)
• Secreción de moléculas especializadas
• Pueden formar compartimentos de moléculas especializadas
• Regulado por una señalización
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Direccionamiento
vesicular
Invaginación dada por un receptor
Dependiente de clatrina + SNARE
Intervención de la dinamina
Participación de v-SNARE y t-
SNARE
Complejos de desacoplamiento
NSF/α-SNAP

Neurotoxina botulínica
(clostridium botulinum) -
acetilcolina
Toxina tetanoespasmia (clstridium
tetani) – Glicina y GABA
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Rutas de clasificación de vesículas de acuerdo al
ligando-receptor

Reciclaje del receptor y Reciclaje del receptor y Degradación del El receptor y el ligando
degradación del ligando transporte del ligando receptor y del ligando se transportan
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 Endosomas
• Capacidad de clasificación para el
transporte de vesículas
• Modelo madurativo
• Considerados como organelos
transitorios (van evolucionando)
• Modelo de compartimiento
estable
• Organelos estables no transitorios
• Pueden dividirse en :
• Tempranos.- Función de
clasificación, se encuentran cercanos
a la región periférica
• Cuerpos multivesiculares (MVB).-
Transportadores selectivos
• Tardíos o prelisosomas.- Cercanos al
aparato de Golgi y núcleo

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 Lisosomas
Generalidades
• Cuerpos densos diámetro: 0.02 μm – 0.5
μm con pH en torno a 5.
• # considerable en células fagocíticas
• Organelos destinados a procesos
enzimáticos (hidrolasas)
• Todos tienen fosfatasa ácida (Marcador
universal de lisosomas)
• Proteínas sintetizadas desde RER
• Transporte por marcaje (M6P)
• Transporte mediado por clatrinas
• Contienen bombas de H+ (reguladores de
pH)
• Membrana fosfolipídica, colesterol y ácido
lisobifosfatídico

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 Lisosomas

Clasificación:
Primarios
Corpúsculos pequeños, contienen
hidrolasas que aun no entran en proceso
de digestión
Secundarios
Corpúsculos de mayor tamaño
Son heterogéneos, presentan cuerpos
residuales
Pigmento de desgaste o gránulos de
lipofuscina en neuronas

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Mecanismos de entrega
de material para
digestión en lisosomas

• Partículas extracelulares grandes

• Fagocitosis – formación del fagosoma
posteriormente lisosoma
• Partículas extracelulares pequeñas
• Pinocitosis y endocitosis – Formación de
endosomas tempranos
• Partículas intracelulares
• Autofagia

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Autofagia

• Degradación de micro y macropartículas

propias de la célula
• Ocurre por; Estrés, falta de alimentos y
padecimientos

• Regulado genéticamente (genes ATG)

• Factores de crecimiento
Clasificación
• Microautofagia
• Macroautofagia
• Autofagia mediada por chaperonas
• HSC73
• LAMP 2-A

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 Degradación mediada por
proteasomas
• Degradación proteica sin intervención lisosómica
• Proteólisis
• Proteínas especializadas con función enzimática
• Marcaje por ubiquitinación
• Proteína activadora de ubiquitina (E1)
• Enzima conjugadora de ubiquitina (E2)
• Ligasa ubiquitina-proteína (E3)
• Enzimas encargadas en la desubiquitinación (DUB)
• Complejo proteasómico (26S)
• 19S RP reconocimiento y liberación de productos
• 20S CP procesos enzimáticos
• Enfermedades asociadas a la degradación
porproteosomas
• Alzheimer y síndrome de Angelman ↓ actividad
• VPH ↑ actividad
Estructura del proteosoma, FridoFoe
Cartoon rendering in UCSF Chimera, CC BY-SA 3.0 25
 Retículo
endoplásmico rugoso
(RER)

• Morfología de sáculos
• Afinidad por tinciones basófilas
• Ergastoplasma, porción citoplasmática con afinidad a tinciones básicas
• Alto contenido de ribosomas
• Participación en la síntesis y modificación de proteínas
• Presencia de ribosomas y polirribosomas o polisomas
• Proteínas translocadoras
• Punto de control de calidad de proteínas
• Bien desarrollado en células secretoras activas
• Células glandulares, fibroblastos activados, plasmocitos, odontoblastos,
ameloblastos y osteoblastos

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Síntesis proteica
en RER
Participan diversos factores
• ARNm maduro
• Ribosomas (corpúsculos de 15 a 20 ηm)
• Reconocimiento de la péptido señal
• Secuencia de 5-10 aminoácidos
• Se encuentra entre los primeros 15-60
aminoácidos de la proteína neosintetizada
• Partícula de reconocimiento señal (SRP)
• Interacción con la proteína de
acoplamiento y translocador
• Modificaciones postraduccionales
• Transporte vesicular

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 Transporte
vesicular RER
• Modificaciones postraduccionales son
el primer paso previo al transporte
vesicular
• Participación proteínas de transporte
vesicular
• Clatrinas
• COP II transporte anterógrado
• RER → cis-Golgi
• COP I transporte retrógrado
• cis-Golgi → RER
• Cisternas aparato de Golgi

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 Neurona. Tinción de violeta de genciana (ribosomas y RER) con
luxol fast blue (mielina)
Síntesis proteica:
Ribosomas libres

Diferentes tipos de proteínas:

• Con secuencia señal
• Dirección al núcleo, mitocondria y
peroxisomas
• Sin secuencia señal
• Permanecen en el citosol
• Eritrocitos – hemoglobina
• Células musculares – actina y miosina
• Neuronas - neurofilamentos
• Queratinocitos – queratina
• Tinción basófila
• Ej. Neuronas - Corpúsculos de Nissl
• Región basófila (RER + cumulo de ribosomas libres)

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[Link]
Retículo endoplásmico
liso (REL)
• Estructura tubular
• Túbulos anastomosados
• Ausencia de ribosomas
• Carece de proteínas de acoplamiento ribosómico
• Participa en el metabolismo de lípidos, esteroides y
glucógeno
• Transporte de lípidos y reciclaje de membrana
• Vesículas
• Proteínas intercambiadoras (mitocondrias)
• Desintoxicación y metabolismo de fármacos
• Moléculas liposolubles
• Enzimas especificas – citocromo 450
• Almacenamiento de Ca+
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Aparato de Golgi
• Tinción por impregnación metálica de Da Fano
• Camillo Golgi (1898) “aparato reticular interno”.
• Estructuras membranosas: sáculos aplanados
(apilados paralelamente), vesículas alrededor,
elementos tubulares
• Agrupación en dictiosomas (cantidad variable).
• Mas desarrollado en células productoras de
glucoproteínas y proteoglucanos
• Ácinos pancreáticos, células caliciformes,
hepatocitos y neuronas
• Modificaciones postraduccionales , clasificación
y envasado de proteínas
• Transporte de proteínas por vía vesicular
• Sin coloración con H-E

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TRÁFICO VESICULAR Y FORMACIÓN
DE VESÍCULAS DE SECRECIÓN

• Marcaje de enzimas M6P

• Vesículas revestidas de clatrina
• Vesículas revestidas de (COPI y
COPII):
• Transporte del RER al aparato de Golgi, COPII
• Vía de retorno: Transporte de Golgi a RER,
COPI, secuencias de reconocimiento:
• Lys-Asp-Glu-Leu (o KDEL).
• Residuos de lisina (KKXX) proteínas ancladas
• Transporte a través de Golgi, transporte
vesicular (COPI)
• Transporte del Golgi a la membrana plasmática,
COPI
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Principales rutas de secreción
proteica desde Golgi
• A membrana plasmática apical (1)
• A membrana plasmática basolateral (5, 6 y 7)
• A endosomas y lisosomas (3 y 4)
• Algunas veces son enviados directo a membrana apical para
su posterior endocitosis (10%)
• A vesículas de almacenaje y posteriormente a citosol
(2)
• Proteínas aglomeradas, sufren un proceso de maduración

Todas estas rutas cuentan con una señal clasificadora

agregada en el TNG

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Mitocondrias
• Tinción verde de Janus
• Generadores de energía – ATP
• Fosforilación oxidativa
• Ciclo del ácido cítrico
• B-oxidación.
• Encierra su propio ADN
• Señalización de muerte celular programada “apoptosis”
• Citocromo C
• Cuenta con ribosomas libres
• Síntesis de sus propias proteínas
• Los eritrocitos y los queratinocitos terminales carecen de
estas
• # de mitocondrias depende de la actividad celular
• Sufren cambios morfológicos
• Configuración ortodoxa.- Crestas prominentes, baja fosforilación
oxidativa
• Configuración condensada.- Crestas difíciles de observar y espacio de
intermembrana amplio. Alta fosforilación oxidativa
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 Mitocondrias
• Cuentan con membrana interna y externa. 10-
20nm de separación
• M. externa: Espesor ≈ 6-7nm
• Conductos aniónicos dependientes de voltaje, d=3nm
• Contiene enzimas: fosfolipasa A2, monoaminooxidasa
y acetilcoenzima A (CoA) sintetasa
• M. Interna: Espesor ≈ 5nm
• Cardiolipina: lípido con 4 ac. Grasos, permite la
permeabilidad dela membrana
• Formación de crestas
• Alberga enzimas (complejos de la cadena de
transporte de electrones) ATPsintasa
• Sistema de translocadores de proteína
especializado
• Complejo TIM (MI)
• Complejo TOM (ME)

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 PEROXISOMAS
• Contienen enzimas oxidativas, catalasas
• Sus proteínas se sintetizan en los ribosomas
citoplasmáticos
• Inclusión cristaloide ( urato oxidasa o uricasa)
• Bien desarrollados en células hepáticas
• Pueden adaptarse rápidamente a estímulos
metabólicos y ambientales
• Aumentar el numero y tamaño
• Catabolismo de ac. grasos. β-oxidación
• Cadena larga
• Ramificados
• Esta mediado por genes
• PPARα metabolismo de lípidos
• Reducción selectiva
• Autofagia

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CITOESQUELETO

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Citoesqueleto
• Filamentos proteicos
(principalmente de actina)
• Microtúbulos (transporte de
moléculas y cromosomas)
• Filamentos intermedios
(estructura o sostén)
• Filamentos de Actina
(permiten el movimiento)

HOS ATCC CRL1543, Actina (Rodamina-faloidina) 38

Microtúbulos

• Transporte vesicular intracelular

• Movimiento de los cilios y flagelos.
• Unión de los cromosomas con el huso
mitótico y sus movimientos durante la
mitosis y la meiosis.
• Elongación y desplazamiento celular
(migración).
• Mantenimiento de la forma celular, en
particular su asimetría.

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Estructura
• Se desarrollan a partir del Centro organizador
de microtúbulos (MTOC), anillos de tubulina γ
• Par de centriolos
• Anclado a núcleo por conector núcleo-cuerpo
basal (NBBC)
• Túbulos de ø ≈ 20 ηm -25 ηm y ε ≈ 5ηm
• PM ≈ 55 kDa
• Lo conforman 13 moléculas de tubulina
• Protofilamentos.- Estructura lineal
• Inestabilidad dinámica: polimerización
(tubulina β, +) y despolimerización (tubulina
α, -)
• Requiere GTP y Mg+
• Catástrofe microtubular
• Participan las proteínas asociadas a
microtúbulos (MAP)
• MAP 1, 2, 3, y 4, MAP- τ, y TOGρ unión a
organelos
• Motoras- dineínas y quinesinas

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 Transporte vesicular: Proteínas motoras
Interactúa el proceso de estabilización selectiva junto
con las MAP motoras:
• Quinesinas
• Desplazamiento hacia +
• Dineínas
• Desplazamiento hacia –
• Uso de ATP
• Participan en el transporte cromosómico
• Dineínas
• Movimiento de los cromosomas a lo
largo de los microtúbulos del huso
mitótico
• Quinesinas
• Movimiento de los microtúbulos polares,
promueven la separación de las células

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 Filamentos de Actina

• Proteína abundante, hasta 20% en células

musculares
• Estructura lineal helicoidal de ø ≈ 6ηm - 8ηm
• Actina F y G. PM ≈ 42 kDa
• Polaridad
• Extremo + (barbado), crecimiento
• Requiere K+, Mg2+ y ATP para la polimerización
• Extremo – (puntiagudo), decrecimiento
• Funciones diversas; movimiento celular
• El comportamiento dinámico esta regulado por
las proteínas unidoras de actina (ABP)

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 Principales funciones
• Anclaje y movimiento de proteínas de la
membrana
• Formación del núcleo estructural de las
microvellosidades en las células epiteliales.
• Formación del anillo contráctil para la división
celular
• Movimiento celular
• Lamelipodio
• Emisión de evaginaciones celulares
• Filopodio
• Contracción del musculo liso

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 Proteínas ABP
• Fascina y fimbrina; rigidez a las microvellosidades,
entrelazado de fibras
• Gelsolina, impide el crecimiento de los filamentos
(se une al extremo +)
• Tropomodulina, regula la longitud
• Cofilina, despolimerización
• Arp 2/3, ramificación de filamentos
• Espectrina, aductina, proteína 4.1, y proteína 4.9,
Formación de enlaces cruzados, proteínas
integrales y periféricas de membrana (eritrocitos)
• Timosina, impide la polimerización mediante la
unión a actina G
• Proteínas motoras, miosina I y II

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Filamentos intermedios
• 8-12ηm diámetro, , PM ≈ 50kDa
• Formados por diversas proteínas ≈ 50
• Proteínas no globulares (α-hélice)
• Conformados por ≈ 310 aminoácidos
• No presentan polaridad
• Dominio bastoniforme
• Dominio globular
• Regulado por la fosforilación/desfosforilación
• No requieren ATP o GTP
• Función completamente estructural
• 6 clases de filamentos
• Asociación con proteínas
• Emerina, receptor de lámina B (LBR), nurima,
desmoplaquinas y placoglobinas
 Filamentos Intermedios

Principales proteínas
• Queratinas acidas y básicas (I y II)
• Células epiteliales
• Heteropolímeros Neurofilamentos NFH Vimentina
• Vimentina, desmina y periferina (III)
• Soporte y conexión entre orgánulos
• Homopolímeros
• Neurofilamentos (IV)
• Sostén y transporte de señales en
neuronas
• Lamina (V)
• Estructura y sostén nuclear
• Filamentos perlados (VI)
• Faquinina y Filensina
• Estructura globular

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Lamina Filesina
 Centriolos y MTOC
• Estructura 93+ 0
• Se encuentran único par
• Ortogonales
• Solo se dividen al entrar a la fase S
• Centrosoma y MTOC
• Material perinuclear y centriolos
• Contiene las estructuras en forma de anillo
(tubulina γ)
• Localización cercana al núcleo y a. Golgi
Participan en :
• Formación de cuerpos basales
• Formación del huso mitótico
• Ciliogénesis
• Móviles (92 + 2)
• Inmóviles (92 + 0)

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Duplicación del centrosoma y formación del cilio primario con el ciclo celular

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 Inclusiones

Estructuras citoplasmáticas o nucleares con propiedades de tinción

características
• Lipofuscina.- Conglomerado de lípidos oxidados, fosfolípidos, metales y
moléculas orgánicas
• Tinción H-E, pigmentos de desgaste
• Hemosiderina.- Conglomerado de hierro, fagocitosis de eritrocitos
• métodos histoquímicos para la detección de hierro
• Glucógeno.- Aglomerados de glucógeno
• Tinción PAS y azul de toluidina
• Gotas lipídicas.- Se localizan en adipocitos y células intestinales
• Cristales.- Con frecuencia en las células de Sertoli y en las células de Leydig

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