REPLICACIN
DEL
ADN
INTRODUCCIN
Mecanismo que permite
transmitir de forma ntegra la
informacin gentica
contenida en el ADN de un
organismo a su descendencia.
Implica la duplicacin de una
molcula de ADN para formar
2 molculas hijas de ADN
idnticas que conservan la
misma secuencia de bases
que la molcula inicial
CARACTERSTICAS
GENERALES
SEMICONSERVATIVA: Conserva la
mitad del material gentico original
en cada una de las copias
BIDIRECCIONAL Y SECUENCIAL:
La replicacin se desarrolla en dos
direciones desde el punto de
replicacin
SEMIDISCONTINUA: Parte de la
hebra crece de forma discontinua
(hebra retardada)
SEMICONSERVATIVA
La molcula de ADN original se abre y se
separa en sus dos hebras. Cada una de ellas
sirve de molde para su hebra complementaria.
As, las dobles hlices resultantes contienen
una hebra antigua o parental y otra de nueva
sntesis.
BIDIRECCIONAL Y
SECUENCIAL
La replicacin comienza en un punto
denominado "Origen de
replicacin"(OriC)
(Un nico OriC en el cromosoma
bacteriano y multiples orgenes en
cromosomas de eucariotas)
A partir del OriC la doble hebra se
abre y se separan las cadenas en
ambos sentidos formndose la
"Burbuja de replicacin"
En cada extremo de este ojal se
forman las "Horquillas de
replicacin"desde las cuales la
replicacin procede
bidireccionalmente.
SEMIDISCONTINUA
Las enzimas responsables de la
duplicacin (DNA Polimerasas) actan
siempre en direccin 5'-3' (leen la
hebra molde en direccin 3'-5')
Y como la sntesis se produce desde el
"OriC" en ambas direcciones,siempre
habr:
En el sentido correcto (5'-3') ,una hebra que crecer de manera
continua a medida que avanza la sntesis
"Hebra
conductora"
En el sentido incorrecto (3'-5'), una hebra que se sintetiza
mediante mentos (fragmentos de Okazak) de forma discontinua y
retrasada
"Hebra Retardada"
LAS ENZIMAS DEL PROCESO DE
REPLICACIN
HELICASA: Desenrolla y separa las hebras del DNA original
SSPB (PROTEINAS DE UNIN A CADENA SENCILLA): Evitan que las hebras
se vuelvan a unir
PRIMASA: ARN Polimerasa-ADN dirigida
Inicia la nueva cadena de ADN
GIRASA Y TOPOISOMERASA: Para relajar las tensiones que se forman
ADN POLIMERASA: Encargada de sintetizar la nueva cadena (en Eucariotas
existen 5 tipos diferentes)
ADN LIGASA: Para unir los fragmentos de ADN
HELICASA
Comienza a actuar en el origen de replicacin previamente
reconocido por la proteina Dna-A
Desenrolla y separa las cadenas de la doble hlice
Avanza por las horquillas de replicacin en ambos sentidos y a
lo largo de la molcula de ADN
Avanza rompiendo los enlaces por Puentes de Hidrgeno entre
las cadenas originales y consumiendo durante el proceso ATP
SSBP
Son protenas estabilizadoras del ADN
Actan unindose a las cadenas sencillas desenrolladas
para evitar que se vuelva a formar la doble hlice
GIRASA Y TOPOISOMERASA
La separacin de las cadenas genera un
superenrollamiento en el resto de la doble hlice
Estas enzimas enzimas relajan la tensin
evitando el superenrollamiento mediante cortes
y empalmes
Las Topoisomerasas cortan y empalman
fragmentos
Las Girasas evitan la tensin mediante el giro del
extremo temporalmente libre
PRIMASA
ARN Polimerasa-ADN dirigida
Enzima capaz de sintetizar una
cadena corta de ARN (unos 10
nucletidos)utilizando un molde
de ADN
Las ARN polimerasas s pueden
iniciar cadenas de ARN
Sintetizan tambin en direccin
5'-3'
Crean los "Cebadores" o
"Primers",que son segmentos
de ARN(unos 10 nucletidos)
sobre los que actan las ADN
Polimerasas para iniciar su
funcin de elongacin
ADN POLIMERASA
Enzima que aade desoxirribonucletidos en el extremo 3'OH
de una cadena polinucletida ya formada
Leen sobre el ADN molde en direccin 3'-5', por lo que
aaden nucletidos nicamente a una cadena que crece en
direccin 5'-3'.
Es decir, catalizan la condensacin del grupo 3'OH libre del
ltimo nucletido de la cadena con el grupo -5'fosfato del
nucletido que se aade
ADN POLIMERASA
CARACTERSTICAS IMPORTANTES:
Todas necesitan una cadena de
ADN que acte como molde
Sintetizan en una nica direccin
5'-3'
Prolongan una cadena
polinucletida, pero no pueden
iniciarlas (necesitan el "cebador"
o "primer")
Tambin tienen actividad
EXONUCLEASA(capaces de
eliminar nucletidos para corregir
errores)
ADN LIGASA
Une fragmentos de ADN entre si (fragmentos de Okazaki) mediante
enlaces fosfodister para dar continuidad a la cadena de nueva sntesis
FASES DE LA REPLICACIN
A.
FASE DE INICIACIN
1. La replicacin se inicia cuando una protena especfica (DnaA) reconoce el origen de replicacin(Ori-C) y se fija a l.
ORIGEN DE REPLICACIN:
Porcin de ADN que contiene
una secuencia caracterstica de
bases.
En organismos Eucariotas
existen mltiples orgenes de
replicacin, por lo que la
replicacin se inicia de forma
simultnea en varios puntos a
la vez.
FASE DE INICIACIN
2. Esta unin activa las Helicasas,
que rompen los enlaces de
hidrgeno entre las bases
complementarias y separan las dos
cadenas de ADN, formndose una
"Burbuja de replicacin".
[Link] proteinas SSBP se unen a las
cadenas para evitar que se
vuelvan a unir.
4. Simultneamente se activan las
Girasas y Topoisomerasas que
van relajando la tensin de la
doble hlice prxima a la horquilla
de replicacin.
FASE DE INICIACIN
B. FASE DE ELONGACIN
1. Sntesis de los Cebadores por
accin de la Enzima Primasa.
Una vez colocados los cebadores,
la Primasa se separa de la cadena
para que entre la ADN Polimerasa III
2. Sntesis de las nuevas cadenas
de ADN a partir de los cebadores.
Esta fase no se desarrolla igual en
toda la cadena, ya que la ADN
Polimerasa acta en direccin nica 5'3' y la replicacin es bidireccional.
Por este motivo en el proceso de
elongacin distinguimos dos tipos de
hebra desde los Ori C.
FASE DE ELONGACIN
Hebra conductora (continua), donde la elongacin se produce en el mismo sentido
en que avanza la horquilla(5'-3') .La sntesis en la cadena conductora requiere
nicamente que acte la primasa formando un cebador de ARN de unos 10 a 60
nucletidos, para a continuacin penetrar la ADN polimerasa III y realizar la
polimerizacin de desoxirribonucletidos.
Hebra retardada (Discontinua),donde la elongacin se produce en sentido contrario
al que avanza la horquilla. La primasa sintetiza un primer cebador alejado del OriC,ya
que en esta hebra se debe esperar a que la horquilla avance para formar el cebador. A
medida que la horquilla avanza, se requiere de la sntesis de nuevos cebadores, que van
creciendo en direccin contraria al avance de la horquilla y que van dando lugar a los
"fragmentos de Osazaki
FASE DE ELONGACIN
Fragmentos de Okazaki:Son las cadenas cortas de ADN
recin sintetizadas en la hebra discontinua
Es decir, cuando la hebra
conductora ha avanzado 10002000 nucletidos, la Primasa
coloca el cebador del primer
fragmento de Okazaki, que a
continuacin es prolongado por
la ADN PolimerasaIII en sentido
opuesto al avance de la
horquilla hasta que se encuentra
con el cebador de la hebra
conductora de la otra horquilla
de replicacin, y ah se
desprende.
FASE DE ELONGACIN
[Link] de los cebadores por
accin de la ADN-Polimerasa I.
La enzima Polimerasa se une a la cadena
a nivel de los cebadores y los elimina por
su actividad Exonucleasa.
Mediante su actividad Polimerasa, alarga
el fragmento anterior formando nuevo
ADN que sustituye al cebador.
Este proceso es conocido como
CORRIMIENTO DE MELLA.
[Link] fragmentos de Okazaki por
accin de la Enzima ADN Ligasa.
La enzima Ligasa une fragmentos
consecutivos mediante enlaces
fosfodister, dando as continuidad a
la hebra retardada.
En este proceso consume energa
generada por la hidrlisis del ATP.
La eliminacin de cebadores y el
sellado de los fragmentos, realmente
discurren en paralelo con el avance de
la horquilla de replicacin.
[Link] DE TERMINACION
[Link] de errores.
Por ltimo, los posibles errores en
la incorporacin de bases se
reparan gracias a la actividad
exonucleasa de la enzima ADN
Polimerasa III
La ADN Polimerasa posee:
- Una actividad de
polimerizacin 5'-3'
El -final
la replicacin
se produce
Una de
actividad
de exonucleasa
cuando la DNA polimerasa III se
3'-5'
encuentra con una secuencia de
terminacin (secuencia ter). Se
produce entonces el desacople de
todo el replisoma( conjunto de
proteinas en la horquilla) y la
finalizacin de la replicacin.
ACTIVIDAD DE LAS
ADN POLIMERASAS EN
ORGANISMOS
PROCARIOTAS Y
EUCARIOTAS
REPLICACIN EN CLULAS EUCARIOTAS
La replicacin en clulas Eucariotas es
similar a las procariotas pero con
algunas particularidades:
Tienen mltiples orgenes de replicacin, se
inicia en varios puntos a la vez.
Hay 5 tipos de ADN polimerasas (elongacin,
eliminacin de cebadores y correcin de errores)
El ADN eucaritico se encuentra unido a
Histonas, por lo que durante la replicacin se
van estructurando tambin los nucleosomas